體視顯微鏡的原理具體如下：

體視顯微鏡光學(xué)結(jié)構(gòu)原理是：由一個(gè)共用的初級(jí)物鏡，對(duì)物體成像后的兩個(gè)光束被兩組中間物鏡亦稱變焦鏡分開，并組成一定的角度稱為體視角一般為12度~15度，再經(jīng)各自的目鏡成像，它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得，利用雙通道光路，雙目鏡筒中的左右兩光束不是平行，而是具有一定的夾角，為左右兩眼提供一個(gè)具有立體感的圖像。體視顯微鏡實(shí)質(zhì)上是兩個(gè)單鏡筒顯微鏡并列放置，兩個(gè)鏡筒的光軸構(gòu)成相當(dāng)于人們用雙目觀察一個(gè)物體時(shí)所形成的視角，以此形成三維空間的立體視覺(jué)圖像。

體視顯微鏡的作用

體視顯微鏡大體分為兩類，每種各有優(yōu)劣。以前的體視顯微鏡系統(tǒng)，即Greenough發(fā)明的光路，利用2物鏡，分別走2條光路，進(jìn)入2個(gè)目鏡分別成像。最近的系統(tǒng)即CMO，利用1個(gè)大的物鏡，按一定角度分為2條光路，進(jìn)入2個(gè)目鏡成像。兩類體視顯微鏡都可以改變放大倍數(shù)，連續(xù)變倍。

一、體視顯微鏡的放大作用

體視顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡×目鏡×中間變倍×附件透鏡倍數(shù)。

中間部分有時(shí)設(shè)計(jì)成滑塊或轉(zhuǎn)盤式的物鏡轉(zhuǎn)換器，便于轉(zhuǎn)換物鏡倍數(shù)。這在過(guò)去的體視顯微鏡中很流行，現(xiàn)在不多見(jiàn)了。最高質(zhì)量的體視顯微鏡是安裝了中間變倍透鏡組的，用于改變放大倍數(shù)。

早期體視顯微鏡只能放大7x-30x，現(xiàn)在學(xué)生用的體視顯微鏡也能放大2x-70x了。中間變倍的體視顯微鏡可放大250x-400x，更高端的研究級(jí)體視顯微鏡可超過(guò)500x。工作距離從20-140mm，增加特殊的附加透鏡，可達(dá)到300mm或更大。附加透鏡可接在特殊設(shè)計(jì)的物鏡口上，用于改變放大倍數(shù)和工作距離。

現(xiàn)代體視顯微鏡配備寬視野、高眼點(diǎn)目鏡，放大倍數(shù)5x-30x。常在目鏡上配膠皮眼罩，避免觀察者的眼鏡直接接觸到目鏡。屈光度可調(diào)，瞳距55-75mm。視場(chǎng)由物鏡倍數(shù)和目鏡的視場(chǎng)光闌尺寸決定。FN即目鏡的視場(chǎng)光闌直徑，在出廠的時(shí)候已經(jīng)固定，所以視場(chǎng)與物鏡倍數(shù)相關(guān)。增加物鏡倍數(shù)，視場(chǎng)變小;相反，減小物鏡倍數(shù)，視場(chǎng)變大。例如使用10x目鏡，低倍物鏡(0.5x)時(shí)，視場(chǎng)范圍約為65-80mm(取決于中間變倍)，比復(fù)式顯微鏡的視場(chǎng)范圍更大(使用相同目鏡、物鏡時(shí)，視場(chǎng)范圍約40mm)。但大的視野要求更高的照明亮度，也往往難以使整個(gè)視野均勻照明。

二、體視顯微鏡的分辨率和景深

與其他光學(xué)顯微鏡一樣，體視顯微鏡的分辨率(D)取決于照明的波長(zhǎng)和物鏡的數(shù)值孔徑。

分辨率(D)=0.61×λ/(n×sinθ)

其中d為最小分辨距離，λ為照明波長(zhǎng)，n為物鏡和樣品間的物質(zhì)折射率，θ物鏡孔徑角的一半。

改變目鏡倍數(shù)并不會(huì)改變分辨率，只能改變放大倍數(shù)，卻不會(huì)增加觀察到的樣品細(xì)節(jié)。所以高倍目鏡(放大倍數(shù)30x或更高)只是空放大。為了對(duì)比顯微鏡之間的差別，分辨率常用每毫米的線數(shù)(lp/mm)表示。

體視顯微鏡附加透鏡放大倍數(shù)為0.3x-2x，可以改變工作距離和分辨率。通常，分辨率與附件透鏡的放大倍數(shù)成正比;視場(chǎng)范圍與放大倍數(shù)成反比;景深與放大倍數(shù)成反比;工作距離與放大倍數(shù)相反，但不成線性比率關(guān)系。另外，使用附件透鏡，在絕大多數(shù)情況下，對(duì)圖像亮度沒(méi)有顯著的影響。

三、體視顯微鏡的顯微照相術(shù)和數(shù)碼成像

Greenough和CMO體視顯微鏡都可以利用傳統(tǒng)的顯微照相術(shù)(膠卷)和數(shù)碼技術(shù)成像。

對(duì)于各種類型的光學(xué)顯微鏡，觀察時(shí)最重要的因素可能要數(shù)樣品的照明方式了，以及照明對(duì)于揭示感興趣特征的效果。體視顯微鏡經(jīng)常利用不同的光源和配置，在反射照明和透射照明系統(tǒng)下檢測(cè)樣品，照明方式對(duì)于成像具有戰(zhàn)略性的意義。

在很多情況下，透射光和反射光照明結(jié)合使用，便于更有效的揭示樣品特性。這篇文章中著重講解反射光照明在鏡檢中的應(yīng)用，包括照明技術(shù)和設(shè)備。用體視顯微鏡檢測(cè)的樣品大多都是三維物體，要求操作者使用最有效的照明，來(lái)觀察感興趣部分的細(xì)節(jié)。

復(fù)式顯微鏡有DIC、偏光、相差、熒光等觀察方式。而體視顯微鏡由于工作距離更長(zhǎng)，數(shù)值孔徑較小，放大倍數(shù)較低，這些觀察技術(shù)很多都不能實(shí)現(xiàn)。體視顯微鏡是通過(guò)多種照明方式實(shí)現(xiàn)的不同觀察。沒(méi)有哪種固定的照明策略是最佳的。根據(jù)不同的樣品，可以有多種機(jī)制，用近乎無(wú)限種照明技術(shù)觀察或多種結(jié)合使用。對(duì)于一個(gè)樣品或物體，盡管有不同的照明方式，但其中某一種可能會(huì)得到最好的觀察結(jié)果。