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熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求
發(fā)布時(shí)間:2020/12/26
(一)載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
(二)蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光 ,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。
(三)標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。
(四)封裱劑
封裱劑常用甘油,必須無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪去 。所以,常用甘油和0.5mol/L pH9.0~9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。
(五)鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,最好使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。
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